對液相色譜柱平衡的探討
點(diǎn)擊次數:1316 更新時(shí)間:2021-04-19
液相色譜柱包括反相色譜柱、陰離子交換樹(shù)脂色譜柱、陽(yáng)離子交換樹(shù)脂色譜柱和離子分離色譜柱。用于反相分離的還有兩種二氧化硅基C8和C18色譜柱。液相色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。
液相色譜柱在使用前需進(jìn)行柱的性能測試,并將結果保存起來(lái),作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行(出廠(chǎng)測試所使用的條件是佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
液相色譜柱的平衡說(shuō)明:
反相柱由工廠(chǎng)測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請確保分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱,您就會(huì )在處理問(wèn)題方面獲得大的“補償”,而且色譜柱的壽命也會(huì )變得更長(cháng),具體操作步驟如下:
1.平衡開(kāi)始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(xiàn)(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長(cháng)的時(shí)間來(lái)平衡)。
2.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應注意用純水“過(guò)渡”即每天分析開(kāi)始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。