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薄層掃描儀的兩大類(lèi)型及應用
點(diǎn)擊次數:1449 更新時(shí)間:2019-04-24
  薄層掃描儀是對薄層色譜進(jìn)行定量檢測分析的儀器,當前市場(chǎng)上有兩類(lèi)薄層色譜掃描儀:
  傳統掃描儀
  是一種全波長(cháng)掃描儀,提供波長(cháng)200-800nm范圍的可選波長(cháng),通過(guò)檢測樣品對光的吸收強弱確定物質(zhì)含量。該掃描儀也能檢測254nm或365nm紫外照射產(chǎn)生的熒光強度,從而進(jìn)行特異性檢測。
  傳統掃描儀的掃描方式分為:?jiǎn)喂馐鴴呙?、雙光束掃描和雙波長(cháng)掃描。
  單光束掃描:采用單一光束(即單一波長(cháng)掃描),其結果就是上圖中一特定波長(cháng)條件下的單條曲線(xiàn)。儀器結構簡(jiǎn)單,但是基線(xiàn)不穩,實(shí)際中很少使用。
  雙光束掃描:采用同一波長(cháng)的兩個(gè)光束同步掃描,一個(gè)光束掃描樣品展開(kāi)通道,另一個(gè)光束掃描樣品通道旁邊的空白區域,這樣就可扣除空白吸收,部分消除薄層板展開(kāi)方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差。但是無(wú)法消除垂至于展開(kāi)方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差。
  雙波長(cháng)掃描:兩個(gè)不同波長(cháng)的光束交替掃描樣品展開(kāi)的通道區域,波長(cháng)選擇時(shí),一個(gè)波長(cháng)為樣品大吸收位置,另一是吸收極小值位置。如上圖所示,如檢測目標為3(則大吸收峰為290nm,極小值可選200nm、260nm或325nm)。這種方法可基本消除鋪板不均產(chǎn)生的誤差,因此掃描基線(xiàn)很穩定。
  以上各種掃描方式中,根據光源大?。⊕呙杈龋┎煌煞譃橹本€(xiàn)掃描和鋸齒掃描。
  直線(xiàn)掃描:用可以覆蓋樣品展開(kāi)通道的寬光束一次性?huà)咄暾麄€(gè)展開(kāi)通道,即在展開(kāi)方向上(圖中橫坐標),每個(gè)點(diǎn)的數據只是一個(gè)掃描數據點(diǎn)。
  鋸齒掃描:采用點(diǎn)狀光源,光點(diǎn)尺寸小于通道寬度,因此在展開(kāi)方向移動(dòng)到任何一點(diǎn)時(shí),光源都要逐點(diǎn)沿樣品通道方向掃描,即形成“之”形(或鋸齒形掃描)。這樣,在展開(kāi)方向上每一點(diǎn)的數據都是多個(gè)點(diǎn)掃描結果的累加值。鋸齒掃描的精度相對直線(xiàn)掃描明顯提高。
  當前,在定量分析中,薄層掃描多采用雙波長(cháng)鋸齒掃描。
  分析誤差
  薄層分析的誤差包括三個(gè)方面:點(diǎn)樣誤差、展開(kāi)誤差、定位誤差和檢測誤差。
  采用自動(dòng)點(diǎn)樣器,誤差可控制在0.5%,熟練的分析人員用毛細管點(diǎn)樣,誤差小于1.0%,若用微量進(jìn)樣器,誤差會(huì )大一些。
  展開(kāi)誤差來(lái)自鋪板的均勻性和樣品展開(kāi)效果,若采用預制的薄層板,誤差會(huì )明顯降低,采用雙波長(cháng)鋸齒掃描,也能有效降低展開(kāi)誤差。
  定位誤差值斑點(diǎn)的位置和大小判定,擴散、脫尾等易產(chǎn)生定位誤差。檢測誤差來(lái)自光源的穩定性、光檢測器的穩定性以及樣品對光吸收(或熒光產(chǎn)生)的線(xiàn)性度等方面。為減少這些誤差,需要非常精密的機電系統,這也直接導致產(chǎn)品高昂的價(jià)格。
  通常情況下,薄層掃描分析的誤差在3%以下。
  薄層數碼成像分析儀
  薄層數碼成像分析技術(shù)是利用數碼成像設備獲得薄層板上各點(diǎn)的光強度信息,之后對獲得圖像進(jìn)行分析的薄層分析技術(shù)。數碼成像設備包括兩種:照相機和掃描儀(由于數碼掃描儀采用逐行成像技術(shù),為便于區分傳統薄層掃描儀的逐點(diǎn)掃描,將數碼掃描儀稱(chēng)為逐行掃描儀)。
  和傳統薄層掃描一樣,照相機或逐行掃描儀都具有光檢測系統,它們都是將光量線(xiàn)性轉化為電信號的元件。不同的是,照相機和逐行掃描儀可進(jìn)一步將電信號轉換成電腦圖像,圖像中單個(gè)點(diǎn)(像素)的顏色深淺反映了光的強弱。
  因此,薄層數碼成像更接近人眼觀(guān)察檢測,結果更直觀(guān),因此非常適合鑒別,特別是中藥指紋圖譜的識別。
  數碼成像儀不僅能完成普通白光照射下的成像分析,再裝配254nm或365nm紫外燈后,也可以檢測特異熒光,特異熒光檢測。
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